📅  最后修改于: 2023-12-03 14:40:42.641000             🧑  作者: Mango
DESeq2是一种用于差异表达分析的R包,用于从RNA-seq数据中鉴定差异表达的基因。它基于负二项分布模型,可以进行有统计意义的基因差异分析。
使用DESeq2进行差异表达分析的一般步骤如下:
安装DESeq2包:
if (!requireNamespace("BiocManager", quietly = TRUE))
install.packages("BiocManager")
BiocManager::install("DESeq2")
加载DESeq2包:
library(DESeq2)
读入表达矩阵数据:
counts <- read.table("counts.txt", header = TRUE, row.names = 1, sep = "\t")
创建一个DESeqDataSet对象:
dds <- DESeqDataSetFromMatrix(countData = counts,
colData = metadata,
design = ~ condition)
其中,countData
是表达矩阵,colData
是样本信息,design
是用于建模的设计矩阵,condition
是需要比较的条件。
标准化数据:
dds <- DESeq(dds)
估计基因表达水平:
rlogMat <- rlog(dds)
计算差异表达基因:
res <- results(dds)
获取调整过的P值和log2折叠变化:
resOrdered <- res[order(res$padj), ]
根据差异表达基因绘制火山图:
plotMA(res, main = "Volcano Plot")
DESeq2还可以进行其他一些功能,例如批次效应校正、可视化结果和基因富集分析等。
希望以上内容能够帮助你更好地了解和使用DESeq2进行差异表达分析。请注意,以上代码片段是用Markdown格式编写的。