📅  最后修改于: 2023-12-03 15:05:11.627000             🧑  作者: Mango
元数据:
Seurat包由Harvard大学R师生开发,是单细胞分析领域中最流行的R包之一。首次发布于2015年,自此成长为公认的单细胞数据分析标准解决方案之一。Seurat可以帮助生命科学家轻松地处理RNA-seq数据,并快速准确的识别细胞亚群。
首先需要在R环境下安装Seurat包。安装方式如下:
install.packages("Seurat")
接下来,需要加载单细胞数据。Seurat包支持多种数据格式,包括10x Genomics数据格式和Matrix格式。以下是加载10x Genomics数据格式的方法:
library(Seurat)
#读入数据
pbmc.data <- Read10X(data.dir = "/path/to/your/data")
pbmc <- CreateSeuratObject(counts = pbmc.data)
数据预处理是单细胞数据分析的关键部分,也是Seurat的一个重要功能。预处理步骤包括:数据归一化、变量筛选、细胞质量控制等。
#数据归一化
pbmc <- NormalizeData(pbmc)
#变量筛选
pbmc <- FindVariableFeatures(pbmc, selection.method = "vst", nfeatures = 2000)
#标准化
all.genes <- rownames(pbmc)
pbmc <- ScaleData(pbmc, features = all.genes)
#细胞质量控制
pbmc <- FilterCells(pbmc, min_genes = 200, minUMI = 600)
Seurat包提供了多种可视化工具,包括交互性可视化和静态可视化。下面的代码展示了使用t-SNE可视化单细胞数据。
#t-SNE可视化
pbmc <- RunTSNE(pbmc, dims = 1:20)
DimPlot(pbmc, reduction = "tsne")
利用聚类算法,可以将单细胞数据划分为不同的亚群。Seurat包提供多种聚类算法,包括常用的k-means聚类、基于PCA的聚类等。
#k-means聚类
pbmc <- FindClusters(pbmc, resolution = 0.5)
#PCA聚类
pbmc <- FindClusters(pbmc, reduction = "pca", resolution = 0.5)
以家园拓扑(Umap)为代表的非线性降维方法,可以更好地展现单细胞数据的聚类效果。
#Umap
pbmc <- RunUMAP(pbmc, dims = 1:20)
DimPlot(pbmc, reduction = "umap")
本文介绍了Seurat包的主要使用方法,希望能够帮助生命科学家更好地处理和分析单细胞数据。Seurat包提供了丰富的功能和易于使用的调用接口,对于初学者而言,也是一个很好的入门选择。欢迎生命科学家尝试并探索Seurat的更多潜力。